腔内心电图辅助定位减少新生儿PICC导管相关并发症的随机对照研究

  目的   探讨腔内心电图（intracavitary electrocardiogram,IC-ECG）辅助定位技术对新生儿经外周静脉置入中心静脉导管（peripherally inserted central catheter, PICC）相关并发症的影响。   方法   选取2017年1月?2019年12月入住四川省人民医院新生儿重症监护室的经上肢PICC置管患儿210例,按随机数字表法分为IC-ECG组和对照组。IC-ECG组按传统体表测量结合IC-ECG辅助定位技术行PICC置管,对照组按传统体表测量定位法行PICC置管,每组患儿105例。比较两组患儿一般资料及导管相关并发症。   结果   两组患儿性别构成、胎龄、置管日龄、导管留置时间、疾病类型及穿刺部位的比较差异无统计学意义（P>0.05）。IC-ECG组导管相关并发症总体发生率为3.8%,低于对照组的21.9%,差异有统计学意义（P<0.05）;其中IC-ECG组的静脉炎和心律失常的发生率较对照组低（P<0.05）。   结论   在新生儿PICC置管过程中,利用IC-ECG辅助定位,可减少导管相关并发症。     

以慢病毒为载体的整合素β8 RNAi在新生鼠脑内干扰效率的研究

目的 制备稳定表达pSicoR-β8 shRNA的慢病毒载体系统,并评估其在新生鼠脑内RNA干扰（RNAi）效率。方法 将慢病毒表达载体pSicoR-β8 shRNA、pSicoR-对照序列与慢病毒包装质粒系统pDM2G、g/p RRE和pRSV Rev分别进行扩增及质粒酶切鉴定,然后共转染293T包装细胞株,通过293T细胞的包装和分泌以收集携带目的干扰片段的慢病毒颗粒。利用PEG-it病毒浓缩试剂进行浓缩,50%组织培养感染剂量法（TCID50）测定病毒滴度。将浓缩后的慢病毒颗粒通过侧脑室注射对新生SD乳鼠中枢神经系统野生表达的整合素β8进行干扰,荧光显微镜下观察慢病毒侧脑室注射后脑组织中绿色荧光蛋白（GFP）的表达,结合RT-PCR和Western blot方法检测β8 mRNA和蛋白在干预后表达水平的变化,以评估RNAi效率及选择最佳干预时间。结果 质粒扩增及酶切结果显示各质粒片段大小分别与质粒图谱大小一致,浓缩后测得的病毒滴度为LV-对照序列:1.0×108PFU/mL,LV-β8 shRNA:5.0×108PFU/mL。慢病毒侧脑室注射后1 d,侧脑室周围即可观察到携带GFP的慢病毒整合到宿主细胞基因组并发出绿色荧光,注射后2 d、3 d和5 d可在脑组织切片中观察到较强的绿色荧光。β8 mRNA表达水平在RNAi后1~3 d出现降低（P＜0.05）,第3天达到最大抑制作用,其β8 mRNA抑制率约为56％。β8蛋白表达变化趋势与β8 mRNA表达变化趋势基本一致,RNAi后第3天达到最大抑制作用,其β8蛋白抑制率约为51％。结论 成功获得滴度达到体内实验要求的含有β8 shRNA的慢病毒颗粒,并具有较好的体内干扰活性,为进一步研究整合素β8在新生鼠脑组织中的生理功能奠定了基础。